synthèse bibliographique sur l'état de l'art des techniques d’extraction d’ADN de certaines espèces végétales(cas de la sauge)

Abstract

Dans le cadre de la recherche scientifique,l'isolement de l'ADN est devenu essentiel dans nombreuses études de biologie moléculaire. Diverses techniques d'isolement d'ADN de certaines espèces végétales principalement de genre Salvia ont été comparées, la méthode basée sur l’utilisation des kits d'isolement d'ADN disponibles sur le marché et l’extraction par le détergent CTAB avec ses modifications. Le taux de réussite de la réaction en chaîne par polymérase (PCR) dépend de la qualité de l'ADN. Les plantes médicinales contiennent des quantités exceptionnellement élevées de métabolites secondaires qui interfèrent avec l'isolement de l'ADN. Pour résoudre ce problème, les protocoles modifiés par CTAB ont été comparés dans la premier exemple pour une extraction efficace d'ADN de la sauge (Salvia officinalis). Le rendement d'ADN génomique le plus élevé avec la meilleure qualité a été obtenu en utilisant du charbon actif et du PVP dans le tampon d'extraction CTAB, en présence de ces composés, les polysaccharides et les polyphénols indésirables ont été éliminés. Ensuite on a fait une autre étude comparative entre trois méthodes étaient basées sur l’emploi des kits d'extraction d'ADN commerciaux (Nucleospin ® Plant (Macherey-Nagel), DNeasy® Plant Mini Kit (Qiagen) et Wizard® Genomic DNA Purification Kit (Promega)) et deux méthodes étaient basées sur CTAB. Les résultats ont montré que la méthode de DNeasy donne le meilleur rendement d’ADN extrait à partir des feuilles fraiches de Salvia officinalis, donc l’etat de la matière première influence sur les résultats d’extraction.