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http://dspace.univ-bouira.dz:8080/jspui/handle/123456789/2966| Titre: | Effet des différents substrats et sous produits alimentaires sur l’activité glutaminasique d’un extrait de culture bactérienne isolée du site Touristique TIKDJDA Wilaya de BOUIRA. |
| Auteur(s): | HAMENNI, Kahina |
| Mots-clés: | L-glutaminase, Streptomyces, sol, screening, Nessler, optimisation. |
| Date de publication: | 1-jui-2017 |
| Editeur: | Université de Bouira |
| Référence bibliographique: | Université de Bouira |
| Résumé: | La L-glutaminase est une amidohydrolase produite par divers microorganismes comprenant les bactéries, les levures et les champignons. Elle est actuellement utilisée dans le traitement de la leucémie aigue lymphoblastique (LAL), le traitement de syndrome de l’immunodéficience humaine SIDA/HIV et comme agent améliorant le goût lors de la fermentation de la sauce de soja. Bien que l’activité L-glutaminase ait été rapportée dans divers microorganismes, la L-glutaminase chez les actinomycètes est très rares. Dans ce présent travail, deux souches de Streptomyces (SH32 et SH38) isolées à partir du sol, ont fait l’objet d’un screening de l’activité L-glutaminase sur milieu MGA (milieu minimum à base de glutamine). Ensuite, les activités enzymatiques des glutaminases produites ont été dosées par une réaction colorimétrique en utilisant le réactif de Nessler. La souche SH 38 a montré une activité enzymatique plus importante (211UI) par rapport à la souche SH 32 (170UI). Enfin, la production de la L-glutaminase par les deux souches étudiées a été optimisée en utilisant différents substrats et sous-produits agroalimentaires comme source de carbone et d’azote dans le milieu de culture. L’amidon, les caséines et la peptone se sont révélés comme étant les meilleures sources de carbone et d’azote respectivement pour la croissance des souches et la production de la L-glutaminase et le son d’orge s’est montré comme étant le meilleur sous produit agroalimentaire permettant la croissance et la production de la L-glutaminase par les souches de Streptomyces. |
| Description: | Table des matières Introduction…………………………………………………………………………………...01 Chapitre I : Les actinomycètes I.1. Définition…………………………………………………………………………...…….03 I.2. Morphologie…………………………………………………………………………..….03 I.3. Ecologie et distribution dans la nature……………………………………………............05 I.4. Physiologie et métabolisme………………………………………………………..……..06 I.5. Critères d’identification des actinomycètes…………………………………….........…...07 I.5.1. Critères morphologiques…………………………..…………………………………....07 I.5.2. Cirières chimiotaxonomiques………………………………………………………..…07 I.5.3. Critères physiologiques…………………...……………………………………………07 I.5.4. Critères moléculaire…………………………………………………………….…...….08 I.6. Cycle de développement des actinomycètes (exemple type : Streptomyces)….................08 I.6.1. En milieu solide……………………………………………………………………...…08 I.6.2. En milieu liquide………………………………………………………………………..08 I.7. Intérêt des actinomycètes………………………………………………………………...09 I.7.1. Extrêmozymes………………………………………………………………………….09 I.7.2. Dans le domaine médical……………………………………………………………....10 Chapitre II : La L-glutaminase II.1. Définition de la L-glutaminase…………………………………………………...……...11 II.2. Présence et distribution de la L-glutaminase…………………………………………….11 Partie I : Synthèse bibliographique II.3. Isoenzymes de la L-glutaminase………………………………………………………...12 II.4. Métabolisme de la glutamine (glutaminolyse)…………………………………………..14 II.4.1. Dans les tissus normaux……………………………………………………………….14 II.4.2 Métabolisme de la glutamine dans les cancers………………………………………....14 II.5. Les conditions de production de la l-glutaminase par les actinomycètes………………..15 II.5.1. La composition de milieu de culture…………………………………………………..15 II.5.2. La technique de culture………………………………………………………………..15 II.5.3. Effet de la température………………………………………………………………...15 II.6. Les applications de la L-glutaminase16 II.6.1. En thérapie anticancéreuse de la leucémie aigue lymphoblastique (LAL)……………16 II.6.2. Autres applications……………………………………………………………………16 II.6.2.1. En thérapie anti-HIV………………………………………………………………...16 II.6.2.2. En industries alimentaires…………………………………………………………...16 Chapitre III : Matériels et méthodes III.1. Matériel biologique……………………………………………………………………..18 III.2. Méthodes………………………………………………………………………………..18 III.2.1. Revivification des souches de Streptomyces………………………………………………18 III.2.2. Préparation de l’inoculum…………………………………………………………….18 III.2.3. Screening de l’activité L-glutaminase (sur milieu solide)……………………………18 III.2.4. Dosage de l’activité L-glutaminase…………………………………………………...19 III.2.5. Optimisation de la production de la L-glutaminase…………………………………..20 Partie II : Etude expérimentale III.2.5.1. Méthode d’optimisation…………………………………………………………….20 III.2.5.2. Effet des sources de carbone…………………..……………………………………20 III.2.5.3. Effet des sources d’azote……………………………………………………………21 III.2.5.4. Effet des sous-produits alimentaires en guise de valorisation……………………...21 III.2.5.4.1. Préparation des substrats………………………………………………………….21 III.2.5.4.2. Ensemencement des milieux de culture…………………………………………..22 Chapitre IV : Résultats et discussion IV.1. Screening de l’activité L-glutaminase (sur milieu solide)………………...……………24 IV.2. Dosage de l’activité L-glutaminase…………………………………………………….25 IV.3. Optimisation de la production de la L-glutaminase…………………………………….25 IV.3.1. Effet des sources de carbone………………………………………………………….25 IV.3.2. Effet des sources d’azotes…………………………………………………………….27 IV.3.3. Effet des sous-produits alimentaires en guise de valorisation………………………..30 Conclusion……………………………………………………………………………………32 Références bibliographique Annexes |
| URI/URL: | http://193.194.80.38:8080/jspui/handle/123456789/2966 |
| Collection(s) : | Mémoires Master |
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