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Title: Étude de l’effet in vitro du Bevacizumab et Trastuzumab sur la viabilité de la larve hydatique d’Echinococcus granulosus.
Authors: REKIBI, Brahim
Keywords: L’hydatidose, E.granulosus, Avastin®, Herceptin®, kyste hydatique, Anticancéreux.
Issue Date: 1-Jul-2017
Publisher: Université de Bouira
Citation: Université de Bouira
Abstract: L’hydatidose est une parasitose endémique en Algérie. Elle est caractérisée par sa persistance au niveau de l’hôte intermédiaire entrainant l’infection chronique. Le traitement par les deux anticancéreux a montré la distorsion structurelle de la couche laminaire du métacestode d'E. granulosus. Notre travail a pour objectif de tester l’effet in vitro de deux type d’anticancéreux Avastin® et herceptin® à déférents concentrations. Nos résultats L’étude histopathologique ont montré un effet dégénératif sur l’integrité des membranes hydatique à des concentrations de 0,1 jusqu’a 30μM d’Avastin® et de 0,1 à 1μM d’herceptin®. L’effet cytotoxique sur le tissu pulmonaire a été observé à partir d’une concentration 5μM d’Herceptin® .Ces deux anticancéreux ont montré une activité antihydatique suggérant leur efficacité dans le développement de nouvelles stratégies thérapeutiques dans le traitement des échinococcoses compliquées en prenant en considération les doses et les effets secondaires de ces médicaments.
Description: Table des matières Introduction ……………………………………………………………………….…..1 Rappels bibliographique Chapitre I: L’échinococcose kystique I. Généralités sur l’hydatidose……...……………………………………….…..3 II. L’épidémiologie de kyste hydatique………….………………………..…..…3 III. La classification d’Echinococcus granulosus ……….………………..…….4 IV. Le cycle biologique ……………………………………………………………......4 IV. 1. L’hôte définitif ………….……………………………………………….…5 IV. 2. L’hôte intermédiaire…………………,………………………………….…5 IV. 3. Hôte accidental…….…………………………………………………….…5 V. La morphologie d’E. granulosus…………………………………………………..7 V. 1. La forme adulte ………………………………………………………….…7 V. 2. La forme ovulaire ou l’oeuf……………………………………………....…8 V. 3. La forme larvaire (ou hydatide)…………………………...……………......8 VI. L’anatomopathologie…………………………………………………...………..9 VI. 1. La structure du kyste hydatique ………………………………………..9 VI. 1.1. Coque ou adventice…………………………………...…............9 VI. 1 .2. La larve hydatique ………………………………….………......9 VI. 1.2.1. La membrane proligère ou germinative…..………......9 VI. 1.2.2. La cuticule……….………………………….………...9 VI. 1.2.3. Le liquide hydatique……………………...….……....10 VI. 1.2.3.1. Le sable hydatique……………..…............10 VI. 1.2.3.2. les protoscolex…………………………....10 VI. 1.2.3.3. Les vésicules proligères……………..........10 VII. L’aspect clinique de l’échinococcos kystique ……………………………..…11 VII. 1. Les symptômes………………………………………………………….....11 VII. 2. Diagnostic d’Echinococcos kystique………………………………...........11 VII. 2.1. La radiographie conventionnelle…………………………….12 VII. 2.2. Évaluation directe d’E. granulosus et de sa viabilité .............12 VII. 2.3. E. Granulosus Sérologie……………………………………..12 VII. 3. Traitement d’echinococcos kystique……………………………………..12 VII. 3.1. Traitement médical………………………………………...…13 VIII. Prophylaxie……………………………………………………………………..14 IX. L’immunité ………………………………………………………………………14 IX. 1. Les antigènes……………………………………………………………..14 IX. 2. Réponse immune de l’hôte……………………………………………….14 Chapitre II: les Anticancéreux I. Histopathologie du cancer …….….………………………………………………16 I. 1. L’apparition de cellules anormales …..…………...…….………………………16 I. 2. Cancérogénèse …………………………….......................................................16 II. Les Anticancéreux……………………………………………………………17 II. 1. Bevacizumab (Avastin®)……………………………………………………...17 II. 1.1. La structure du Bevacizumab……………………………………..……...18 II. 1.2. Mécanisme d’action du Bevacizumab………………………………......18 II. 2. Trastuzumab (Herceptin®)………………………………………………..19 II. 2.1. La structure de trastuzumab…………………………………………………19 II. 2.2. Mécanisme d’action……………………………………………………………19 II. 2.2.1. Au niveau intracellulaire………………………………..……19 II. 2.3.2. Au niveau extracellulaire…………………………………….20 III. L’intérêt de l’étude de l’effet anti parasitaire des anticancéreux……......21 Chapitre III: Matériels et méthodes I. Matériels et méthodes ………………………………………………………..…...22 I. 1. Matériels………………………………………………....……………………22 I. 1.1. Matériel non biologique .… ..……………………….……………….…..22 I. 1.2. Matériel biologique ………………………….……………………....24 I. 2. L’examen macroscopique des poumons………………………………...25 I. 3. Techniques de préparation des coupes histologiques…………………...27 I. 3.1. Méthodes….……………………………………………………………………...27 I. 3.1.1. préparation les solutions d’anticancéreux et le glycérol…………..…...27 I. 3.1.2. Macroscopique (recoupe des prélèvements)…………………………..….28 I. 3.1.3. Intégration des fragments tissulaire dans le milieu de culture……… .28 I. 3.1.4. la fixation des pièces dans le formaldéhyde………………………………30 I. 3.1.5. Déshydratation et éclaircissement…………………………………………30 I. 3.1.6. Inclusions…………………………………………………………………... .32 I. 3.1.7. La réalisation des coupes histologiques…………………………………..32 I. 3.1.8. Etalement, collage et séchage………………………………………………33 I. 3.1.9. Déparaffinage et réhydratation……………………………………………33 I. 3.1.10. Coloration et montage ……………………………………………………33 I. 3.1.11. Observation microscopique des coupes histologiques………………..34 II. La recherche in silico de l’epidermal growth factor receptor chez Echinococcus granulosus…………………………..…...………………………...35 II. 1. Evaluation de l’homologie de séquence par alignement des séquences contre la base de données Uniprot®………………………………………………………….....….35 Chapitre IV: Résultats et discutions I. Résultats ……………………………………………………………………………..37 I. 1. Examen macroscopique………………………………………………………….…37 I. 2. Etude histologique du tissu pulmonaire…………………………………………..37 I. 2.1. Poumon sain……………………………………………………………37 I. 2.2. Poumon affecté par un kyste hydatique………………………………...38 I. 2.3. Etude de l’effet in vitro d’Avastin® sur l’intégrité des fragments tissulaires d’un poumon hébergeant un kyste hydatique ………………………………...……38 I. 2.3.1. Avastin® à 0,1 μM ………………………………………….….39 I. 2.3.1.1. Avastin® à 1 μM …………………………………………..…40 I. 2.3.1.2. Avastin® à 5 μM ………………………………………….…40 I. 2.3.1.3. Avastin® à 10, 20 et 30 μM …………………………………41 I. 2.4. Etude de l’effet in vitro d’herceptin® ………………………………………….41 I. 2.4.1. Herceptin® à 0,1 μM …………………………………………………42 I. 2.4.2. Herceptin® à 1 μM. ..............................................................................42 I. 2.4.3. Herceptin® à 5 μM ……………………………………………………42 I. 2.4.4. Herceptin® à 10 μM …………………………………………………..42 I. 2.4.5. Herceptin® à 20 μM ..............................................................................43 I. 2.4.6. Herceptin® à 30 μM …………………………………………………..43 I. 3. La recherche du facteur HER2 in silico……...……………………………………44 I. 3.1. Résultat du blast………………………………………………….……….45 I. Discussion……………………………………………………………………………45 Conclusion et perspectives……………………………………………………............48 Référence bibliographique Annexes Glossaire Résumé
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