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Title: Extraction des poly-phénols de trois plantes médicinales (Inula viscosa, Pistacia lentiscus et Olea europea sylvestris) et leurs activités anti-oxydante in-vitro et anti inflammatoire in-vivo.
Authors: MANCER, Lamia
KESSOURI, Karima
Keywords: Pistacia lentiscus, Inula viscosa,, Olea europea sylvestris, poly-phénols, activité anti-oxydante, toxicité, activité anti-inflammatoire
Issue Date: 28-Jun-2017
Publisher: Université de Bouira
Citation: Université de Bouira
Abstract: Dans ce travail une extraction de l’extrait brut des trois espèces : Pistacia lentiscus, Inula viscosa, et Olea europea sylvestris,a été réalisée en utilisant trois méthodes d’extraction : l’extraction assistée par micro-ondes, l’extraction assistée par ultrasons et une méthode conventionnelle par agitation magnétique. En vue d’étudier la composition en composés phénoliques de ces extraits, des dosages colorimétriques (dosage des poly-phénols totaux, flavonoïdes et des tanins….) ont été effectuées. Le pouvoir antioxydant a été testé in vitro en utilisant le radicale libre DPPH. L’effet anti-inflammatoire de ces extraits a été également évalué in vivo sur des souris de souche NMRI. Les résultats démontrent que l’extrait de Pistacia lentiscus obtenu par micro-onde représente le taux d’extraction le plus important (37,2%) et la teneur la plus élevée en mposés phénolique et en tanins qui sont respectivement 30,6 ±0,07mg EAG/g SM et 3, 08 ±0,02 mg EAC /g.SM. Alors que la teneure plus élevée des flavonoïdes a été présentée par Inula viscosa 15,68 ± 0,02 mg ER/g. Pour le test antioxydant, les trois espèces montrent un effet anti oxydant important, mais avec des valeurs variable, où le pourcentage d’inhibition de radical DPPH le plus puissant est celui de Pistacia lentiscus (92,077%). Le test de toxicité effectué sur les souris montre que tous les extraits des plantes employées ne présentent aucune toxicité aux doses de 150 et 300 mg/kg de pc, ce que nous a permit de tester les extrait sur les souris pour évaluer leurs effet anti inflammatoire, les résultats montrent que les trois plantes ont un effet dose dépanadant sur l’inflammation et l’extrait de l’olea europea sylvestris qui présente le pourcentage d’inhibition le plus élevé (49,88%)
Description: Table des Matiéres.................................................................................................... Liste d’abréviations ............................................................................................ I Liste des figures .................................................................................................... II Liste des tableaux ............................................................................................ IV Introduction générale ................................................................................... 1 Chapitre I : présentation des plantes étudiées .............................................................................. 3 I.Généralités sur les plantes médicales ........................................................................................... 3 II.Description des plantes étudiées .................................................................................................. 3 I.1. L’olivier .................................................................................................................................... 3 I.1.1. Etude botanique ....................................................................................................................... 4 I.1.1.2 Description morphologique .................................................................................................... 4 I.1.1.3 Classification taxonomique .................................................................................................... 4 I.1.2. Constitutions chimiques ........................................................................................................... 4 I.1.3. Utilisation en médecine traditionnelle ..................................................................................... 5 I.1.4. Habitat Et Culture ..................................................................................................................... 5 II. 2. Lentisque ................................................................................................................................ 5 II.2.1. Etude botanique .................................................................................................................... 5 II.2.1.1. Description morphologique ................................................................................................ 6 II.2.1.2. Classification taxonomique ................................................................................................ 6 II.2.3 Constitution chimique ............................................................................................................ 6 II.2.2 Utilisation en médecine traditionnelle .................................................................................. 6 II.2.4. Habitat ................................................................................................................................ 7 II.3. Inule ........................................................................................................................................ 7 II.3.1. Etude botanique .................................................................................................................... 7 II.3.1.1. Description morphologique ................................................................................................ 7 II.3.1. Classification taxonomique ................................................................................................... 8 II.3.2. Constitution chimique ........................................................................................................... 8 II.3.2. Utilisation en médecine traditionnelle .................................................................................. 8 II.3.3.Habitat ................................................................................................................................ 8 Chapitre II : Composés phénoliques et activités biologiques ........................................................ 9 I .Composés phénoliques ................................................................................................................ 9 I.1. Définition des composés phénoliques ...................................................................................... 9 I.2. Utilisation et propriété biologique des poly phénols ................................................................ 9 II.3. Origine des composés phénolique ........................................................................................... 9 I.4. Les principales classes des composés phénoliques ................................................................... 9 I.4.1. les acides phénols ................................................................................................................ 10 I.4.1.1. Acide phénols dérivés de l’acide benzoïque ..................................................................... 10 I.4.1.2.Acide phénols dérivés de l’acide cinnamique .................................................................... 10 I.4.2. Les tanins ............................................................................................................................... 10 I.4.2.1. Les tanins hydrolysables .................................................................................................... 11 I.4.2.2. Les tanins Non hydrolysables / condensé. ....................................................................... 11 I.4.3 Les flavonoïdes ......................................................................................................................... 11 I.4.3.1. Structure chimique .......................................................................................................... 11 I.4.3.2. Classification des flavonoïdes ............................................................................................. 11 II. Activités biologiques .................................................................................................................. 12 II.1. Activité Anti oxydante ........................................................................................................... 12 II.1.1. Les radicaux libres ............................................................................................................... 12 II.1.2. Antioxydants ........................................................................................................................ 12 II.1.3. Stress oxydatif ..................................................................................................................... 12 II.1.4. Activité anti oxydante des poly-phénols ............................................................................. 13 III. Activité anti-inflammatoire ...................................................................................................... 13 III.1.Définition de l’inflammation .................................................................................................. 13 III.2. Phases de l’inflammation ...................................................................................................... 13 III.2.1.Phase vasculaire ..................................................................................................................... 13 III.2.2.Phase cellulaire .................................................................................................................... 13 III.2.3.Phase de résolution ............................................................................................................. 13 III.3.Types de l’inflammation ......................................................................................................... 14 III.3.1. Inflammation aigue ............................................................................................................ 14 III.3.2. Inflammation chronique ..................................................................................................... 14 Chapitre III : Matériels et méthodes ............................................................................................. 15 Parties expérimentales I. Matériels .................................................................................................................................. 15 I.1. Matériels végétal .................................................................................................................... 15 I.1.1. Description du matériel végétal ........................................................................................... 15 I.2. Matériel biologique ................................................................................................................. 16 II. Méthodes ............................................................................................................................... 16 II.1. Récolte du matériel végétal ................................................................................................... 16 II.2. Traitement des échantillons ................................................................................................... 17 II.2.1. Nettoyage ............................................................................................................................ 17 II.2.2. Séchage ............................................................................................................................... 17 II.2.3. Broyage ............................................................................................................................... 18 II.2.4. Tamisage .............................................................................................................................. 18 II.3. Evaluation du taux d’humidité ............................................................................................... 18 II.4.Extraction ............................................................................................................................... 18 II.4.1. Extraction par macération ................................................................................................... 18 II.2.Extraction par micro-onde ...................................................................................................... 19 II.3.Extraction par ultrason ............................................................................................................ 19 III. Détermination du rendement .................................................................................................. 20 IV. Étude phytochimique ............................................................................................................... 20 IV.1. Dosage des poly-phénols totaux ........................................................................................... 20 IV.2. Dosage des flavonoïdes ......................................................................................................... 20 IV.3. Dosage des tanins ................................................................................................................. 21 V. Evaluation de l’activité anti oxydante ....................................................................................... 21 V.1. Test au DPPH .......................................................................................................................... 21 V.2.Principe .................................................................................................................................. 21 V.3.méthode ............................................................................................................................... 21 VI. Evaluation de toxicité des extraits ........................................................................................... 22 VII. L’activité anti-inflammatoire .................................................................................................. 22 VII.1.Préparation des extraits ........................................................................................................ 22 VII .2.Induction de l’inflammation ................................................................................................. 24 VII.3.Évaluation de l’activité anti-inflammatoire .......................................................................... 24 VII.3.1. Mesure de l’oedème .......................................................................................................... 24 VII .3.2. Formule numération sanguine ......................................................................................... 25 VII.4. Etude histologique ............................................................................................................... 25 VII.4.1. Echantillonnage ................................................................................................................. 25 VII.4.2.Fixation ............................................................................................................................... 26 VII.4.3. Décalcification ................................................................................................................... 26 VII.4.4. Macroscopie ...................................................................................................................... 26 VII.4.5. Déshydratation .................................................................................................................. 26 VII.4.6. Inclusion et enrobage ........................................................................................................ 26 VII.4.7. Coupe ............................................................................................................................... 26 VII.4.8. Coloration .......................................................................................................................... 26 VIII. Analyse statistique ................................................................................................................. 26 Chapitre IV : Résultats et discussion ............................................................................................ 27 I .Taux d’humidité .......................................................................................................................... 27 II. Taux d’extraction ....................................................................................................................... 27 III. Etude phytochimique ............................................................................................................... 29 III.1. Teneurs en poly-phénols totaux ............................................................................................ 29 III.2.Teneurs en flavonoïdes ......................................................................................................... 30 III .3.Teneurs en tanins .................................................................................................................. 31 IV. Activité anti oxydante .............................................................................................................. 32 V. Test de toxicité .......................................................................................................................... 33 VI. Test anti inflammatoire ............................................................................................................ 34 VI.1. Pourcentage d’augmentation de l’oedème de la patte ......................................................... 34 VI .1.1. Lot témoin ......................................................................................................................... 34 VI.1 .2.Lot standard ....................................................................................................................... 35 VI. 1.3.Lots traité par l’extrait d’Inula viscosa ............................................................................... 35 VI.1.4.Lots traité par l’extrait de Pistacia lentiscus ....................................................................... 36 VI.1.5.Lots traité par l’extrait d’Olea eoropea sylvestris ............................................................... 37 VI.2.Pourcentage de l’inhibition de l’oedème de la patte ............................................................ 37 VI.2.1 Lot standard ........................................................................................................................ 37 VI.2.2.Lot traité par Inula viscosa .................................................................................................. 38 VI.2.3. Lot traité par Pistacia lentiscus .......................................................................................... 39 VI .2.4.Lot traité par Olea europea sylvestris ................................................................................ 39 VI .2.4. Formule numération sanguine .......................................................................................... 41 VI.2.5. Coupes histologiques …………………….. .......................................................................... 42 Conclusion générale ...................................................................................................................... 43 Références bibliographiques ........................................................................................................ 44 Annexes Résumé
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