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Titre: L’effet de l’acide salicylique sur la formation de biofilm de Pseudomonas aeroginosa
Auteur(s): ATTOUI, Hassiba
RAFA, Amina
Mots-clés: P. aeruginosa, Acide salicylique, CMI, CMB, biofilm,
Date de publication: 25-jui-2018
Editeur: Université de Bouira
Référence bibliographique: Université de Bouira
Résumé: Pseudomonas aeruginosa est un pathogène opportuniste résistant à plusieurs antibiotiques. La résistance a été associée à la formation de biofilm bactérien favorisée par la présence d'exopolysaccharides (EPS) et la capacité à exprimer de nombreux facteurs de virulence. Dans notre étude, nous avons étudié l'utilisation de l'acide salicylique (AS) pour affecter la croissance et formation de biofilms de P. aeruginosa par la méthode de coloration au cristal violet (CV). Les résultats ont montré que CMI et CMB d’AS contre la bactérie étudiée a été enregistrées autour de 2,5 mM et 10 mM respectivement et la formation de biofilm a été fortement diminué lorsqu'il est incubé avec les concentrations d’AS sous-inhibitrices.
Description: Sommaire Liste des abréviations Liste des figures Introduction…………………………………………………………………………………..1 Chapitre I : Pseudomonas aeruginosa……………………………………………………………….3 I.1. Présentation de Pseudomonas aeruginosa……………………………………………………..3 I.1.1. Nomenclateur……………………………………………………………………………3 I.1.2. Classification…………………………………………………………………………….3 I.1.3. Habitat…………………………………………………………………………………...3 I .2. Caractéristique générale de Pseudomonas aeruginosa………………………………………..4 I .2.1. Caractères structuraux………………………………………………………………….4 I .2.2. Caractéristiques biochimiques…………………………………………………………..4 I-2.2.1. Principales Caractéristiques de métabolisme………………………………………….5 I-2.2.2. Production de pigments……………………………………………………………….5 I .2.3. Caractéristiques culturales………………………………………………………………5 I .2.4. Caractéristiques génomiques……………………………………………………………5 I .3. Les facteurs de virulences………………………………………………………………..6 I .3 .1. Facteurs de virulence de surface……………………………………………………….6 I .3 .2. Facteurs de virulence enzymatiques………………………………………………….10 I .4. Infection par Pseudomonas aeruginosa………………………………………………………13 Chapitre II : Biofilms………………………………………………………………………...14 II.1. Définition de biofilm……………………………………………………………………14 II.2. Les étapes de la formation du biofilm de P.aerugénosa…………………………………….15 II.2.1. Adhésion réversible…………………………………………………………………...15 II.2.2. Adhésion irréversible………………………………………………………………….16 II.2.3. Maturation primaire…………………………………………………………………...16 II.2.4. Maturation secondaire………………………………………………………………...16 II.2.5. Détachement……………………………………………………………………..……16 II.3.Les facteurs favorisant la formation d’un biofilm ………………………………………16 II.3.1. Les caractéristiques de la surface……………………………………………………..17 II.3.1.1. Rugosité de la surface………………………………………………………………17 II.3.1.2. Propriétés physico-chimiques de la surface…………………………………………17 II.3.1.3. Présence de films protéiques sur la surface………………………………………...17 II.3.2. Caractéristiques du milieu……………………………………….………………….. 18 II.3.3. Caractéristiques des microorganismes………………………………………………...18 II.4. Régulation de la formation de biofilm…………………………………………………..18 Chapitre III: L’acide salicylique…………………………………………………………...…20 III.1. Définition de l’acide salicylique…………………………………………………..……20 III.2. Structure et biosynthèse de l’acide salicylique…………………………………………20 III.3. Rôle physiologique de l’acide salicylique…………………………………………...…21 Chapitre IV : Matériel et méthodes…………………………………………………………24 IV.1. Lieu d’étude…………………………………………………………………………....24 IV.2. L'objectif……………………………………………………………………………….24 IV.3. Matériel………………………………………………………………………...………24 IV.4 Méthode…………………………………………………………………………………24 IV.4.1. Etudes des caractères culturaux, morphologiques, et biochimiques de Pseudomonas aeruginosa……………………………………………………………………………………………....24 IV.4.1.1. Etude macroscopique des colonies…………………………………………………25 IV.4.1.2. Etude microscopique……………………………………………………………….25 IV.4.1.3. Croissance à 4°C et 42°C…………………………………………………………..25 IV.4.1.4. Production d’oxydase………………………………………………………...…….25 IV.4.1.5. Production de catalase…………………………………………………...…………25 IV.4.1.6. Production des pigments…………………………………………………………...25 IV.4.1.7. Utilisation du mannitol et recherche de la mobilité…………………………..……26 IV.4.1.8. Recherche de type respiratoire……………………………………………………..26 IV.4.1.9 Hydrolyse de l’amidon……………………………………………………………...26 IV.4.2 Détermination de la Concentration Minimale Inhibitrice (CMI) de l’Acide salicylique………………………………………………………………………………….…26 IV.4.3 Détermination de la Concentration Minimale Bactéricide (CMB) de l’Acide salicylique…………………………………………………………………………………… 28 IV.4.4 L’étude de l’effet acide salicylique sur la formation de biofilm par Pseudomonas aeruginosa…………………………………………………………………………………………...….28 Chapitre V : Résultats et Discussion………………………………………............................31 V.1. Résultats………………………………………………………………………………...31 V.1.1. Etudes des caractères culturaux, morphologiques et biochimie de Pseudomonas aeruginosa………………………………………………………………………………………………31 V.1.1.1. L'étude macroscopique……………………………………………………………...31 V.1.1.2. L'étude microscopique…………………………………………………………...….31 V.1.1.3.Croissance à 4°C et à 42°C…………………………………………………………..32 V.1.1.4.Test de l’oxydase……………………………………………………………...……..32 V.1.1.5.Test de la catalase……………………………………………………………………32 V.1.1.6. Recherche de type respiratoire…………………………………………………...…33 V.1.1.7.Utilisation du mannitol et recherche de la mobilité………………………………....33 V.1.1.8. Dégradation de l’amidon………………………………………………………........33 V.1.2.Détermination de la Concentration Minimale Inhibitrice (CMI) de l’Acide salicylique………………………………………………………………………………….…34 V.1.3. Concentrations Minimale Bactéricide (CMB) de l’acide salicylique……………..…..36 V.1.4. L'effet de l’acide salicylique sur la formation de biofilm par P. aeruginosa……...37 V.2. Discussion………………………………………………………………………………38 Conclusion……………………………………………………………………………………40 Références bibliographiques Annexe Résumé
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