Optimisation de l’extraction et étude des activités antibactérienne et anti-hémolytique des protéines de l’ail : Allium Sativum.

Abstract

L'Allium sativum L. est une plante médicinale et un membre de la famille Alliaceae. Les constituants chimiques les plus signalés dans les bulbes d’ail sont les composés soufrés et les protéines qui représentent 6% de la composition totale de la plante, ces derniers ont été l’objet de notre étude. Nous avons réalisé une étude préliminaire sur le choix de la méthode d’extraction et l’effet de facteur temps, les meilleurs résultats ont été obtenus lors de l’extraction par macération avec l’utilisation du broyat frais.L’optimisation de l’extraction de la fraction protéique via le plan d’expérience Box-Behnken (RSM) a été une étape suivante avec comme paramètres optimales ; un pH de 6,22, un temps de macération de 1h42 min et une température de 24,53 C°. La fraction optimisée a subi une électrophorèse SDS-PAGE dont deux bandes ont été révélées, celle d’Alliinase (110 kDa) et celle de ASPI et/ou SOD avec un poids moléculaire voisinage de 20 KDa. La méthode de diffusion des puits a été utilisé afin d’étudier la sensibilité de Entérococcus faecalis et Staphylococcus aureus vis-à-vis l’extrait, une zone de 20 ±0,5 mm été exprimé par les deux souches. L’étude a été complété par la détermination de la CMI par la méthode de dilution en milieu liquide et la CMB sur milieu solide pour les mêmes souches qui ont exprimé une CMI de 9 ,36 mg/ml et 18,72 mg/ml respectivement pour Entérococcus faecalis et Staphylococcus aureus. Les CMB ont été révélés a partir de : 37 ,45 mg/ml et 9 ,36 mg/ml respectivement pour Entérococcus faecalis avec un effet moyennement bactéricide et Staphylococcus aureus avec un effet bactéricide. Enfin, le travail été achevé par l’étude de l’activité anti-hémolytique du même l’extrait sur les érythrocytes humains et en présence d’un générateur d’hémolyse, le H2 O2. Le pourcentage le plus significative de l’activité été de 94,24% pour une concentration protéique de 0,25 mg/ml.